陰道刺激試驗

通過進(jìn)行陰道粘膜刺激試驗，我們可以模擬產(chǎn)品在實際使用中對陰道黏膜的影響，從而評估其安全性和刺激性，為產(chǎn)品上市提供科學(xué)依據(jù)，為消費者提供更加安全、可靠的產(chǎn)品，從而保護(hù)消費者的健康。

陰道刺激試驗應(yīng)僅考慮用于預(yù)期與陰道組織接觸的材料:

醫(yī)療器械：如婦科檢查器械、陰道給藥器等。

計生用品：如避孕套、避孕環(huán)等。

衛(wèi)生用品：如衛(wèi)生巾、護(hù)墊、濕巾等。

消毒用品：如女性洗液、消毒凝膠等。

并且只有在用其他方法不能得到安全性數(shù)據(jù)的情況下才考慮進(jìn)行 。

試驗依據(jù)

醫(yī)療器械生物學(xué)評價 第10 部分:刺激與皮膚致敏試驗GB/T 16886.10-2017附錄B.6

醫(yī)療器械生物學(xué)評價 第 10 部分:刺激與遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗 IS0 10993-10:2010

一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) G 15979-2002

醫(yī)療器械的生物學(xué)評價 第 23 部分:刺激性試驗 ISO10993-23:2021附錄D.6

一般采用以上四種標(biāo)準(zhǔn)中推薦的方法對樣品原液/樣品浸提液引起陰道組織刺激反應(yīng)的潛在性進(jìn)行評價。

應(yīng)排除的試驗材料

任何已顯示為皮膚或眼的刺激物,或 pH≤2. 0或 ≥11. 5的材料不應(yīng)再進(jìn)行試驗,可標(biāo)示為潛在的陰道組織刺激物。

試驗材料

在進(jìn)行試驗以及解釋刺激/致敏試驗數(shù)據(jù)時,應(yīng)考慮醫(yī)療器械在人體應(yīng)用時的接觸性質(zhì)、程度、頻率、時間和條件等因素,對這些試驗最關(guān)鍵的因素之一就是試驗材料的制備 。

浸提條件建立在通常可行并經(jīng)論證為一個標(biāo)準(zhǔn)化方法的基礎(chǔ)之上,在多數(shù)情況下為產(chǎn)品使用 的適當(dāng)加嚴(yán)的條件。應(yīng)在下列之一的條件下進(jìn)行浸提：

a)    (37±1) ℃     (72±2)h;

b)    (50±2) ℃     (72±2)h;

c)    (70±2) ℃      (24±2)h;

d)    (121±2) ℃    (1±0. 1)h。

標(biāo)準(zhǔn)表面積和浸提液體積

注:由于制造過程原因,許多彈性體表面特性可能與一般塊狀材料的表面特性有所不同。

浸提時應(yīng)使用極性和非極性兩種溶劑。浸提介質(zhì)示例:

a)    極性浸提介質(zhì):水、生理鹽水;

b)   非極性浸提介質(zhì):符合各國藥典質(zhì)量規(guī)定的新鮮精制植物油(如棉籽油或芝麻油);

c)    其他浸提介質(zhì):乙醇/水、乙醇/生理鹽水、聚乙二醇400(稀釋至生理滲透壓)、二甲基亞砜。

動物與管理

應(yīng)使用健康、初成年的雌性白化兔,同一 品系,體重不低于2kg。如使用其他種屬應(yīng)經(jīng)過論證。

應(yīng)使動物適應(yīng)環(huán)境,并按 ISO10993-2的規(guī)定飼養(yǎng)。

初試應(yīng)至少使用3只動物評價試驗材料,另取3只動物作為對照組。

初試反應(yīng)如疑似或不明確時,應(yīng)考慮進(jìn)行復(fù)試。

每次試驗操作前應(yīng)檢查動物陰道溢液、水腫和/或其他感染、刺激和/或損傷跡象。在動物發(fā)情期階段也應(yīng)檢查陰道,以避免由于陰道的生理變化而作出假陽性反應(yīng)判定。

試驗步驟

試驗樣品制備

將試驗動物置于固定器中固定

將一短軟管(6cm)或一鈍頭插管與一容量大于 1mL的注射器連接 , 注射器和導(dǎo)管注滿后可使動物能接受1mL試驗樣品。應(yīng)為每只動物分別準(zhǔn)備一套注射器和連接導(dǎo)管。

導(dǎo)管可用對照液或適當(dāng)?shù)臐櫥瑒駶櫶幚怼?/span>

提起動物尾巴暴露出陰道口 ,然后將濕潤處理過的導(dǎo)管輕柔地插入陰道,用注射器注入1mL試驗樣品。抽出導(dǎo)管并以適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ幹玫簟?/span>

由于動物個體陰道容積的差異性 ,試驗樣品注入時或注入后可能會有溢出,可用軟紙巾輕輕拭去溢出的液體。

每次間隔(24±2)h重復(fù)上述步驟 ,至少連續(xù)5d。

對于長期重復(fù)接觸試驗 ,應(yīng)根據(jù)預(yù)期臨床應(yīng)用情況確定試驗用量、接觸次數(shù)、時間和間隔期。

動物觀察

初次接觸后(24±2)h和每次試驗操作前注意并記錄陰道口和會陰部位溢液、紅斑和水腫跡象。

對于出現(xiàn)過度溢液、紅斑或難以給藥的動物,應(yīng)無痛處死后做組織學(xué)檢查。

結(jié)果評價

肉眼觀察評價

末次接觸后(24±2)h無痛處死動物,完整切下陰道后縱向剖開,檢查上皮組織層的刺激、損傷以及壞死跡象。

將取下的陰道組織放入適當(dāng)?shù)墓潭▌┲泄潭ê筮M(jìn)行組織學(xué)檢查。每塊陰道組織應(yīng)取其兩端和中央三部分。

將接觸過試驗材料的動物陰道與對照動物的陰道進(jìn)行比較。

記錄并描述肉眼觀察下每只動物陰道組織的狀況,注意試驗組與對照組之間的差別。

注 : 這些觀察可能有助于組織學(xué)評價。

組織學(xué)評價

應(yīng)由病理學(xué)家對陰道組織的刺激作用進(jìn)行評價,可按口腔、陰莖、直腸和陰道組織反應(yīng)顯微鏡檢查記分系統(tǒng)給出的記分系統(tǒng)對每一組織進(jìn)行評分。試驗組全部動物顯微鏡評價記分相加后再除以觀察總數(shù)即得出試驗組平均記分。最大記分為16。對照組同法計算。

對照組動物出現(xiàn)顯微鏡評價總分大于9時,表明試驗操作中可能造成損傷。如其他試驗或?qū)φ談游锍霈F(xiàn)同樣的高分時,可能有必要進(jìn)行復(fù)試。

組織學(xué)評價

氯化鈉對照組（陰道上端-陰道下端-陰道中端）

口腔、陰莖、直腸和陰道組織反應(yīng)顯微鏡檢查記分系統(tǒng)

試驗組平均記分減去對照組平均記分即得出刺激指數(shù)。

對于長期重復(fù)接觸試驗 ,可將刺激指數(shù)表修改為適合于對有關(guān)慢性刺激組織反應(yīng)的評價。

刺激指數(shù)表

試驗報告

試驗報告應(yīng)包括 :

a)    試驗樣品的描述 ;

b)   試驗樣品預(yù)期用途/應(yīng)用 ;

c)    制備樣品所用方法的詳細(xì)描述 ;

d)   試驗動物的描述 ;

e)    接觸方法 ;

f)    試驗部位記分 ;

g)    觀察記錄 ;

h)   組織學(xué)評價 ;

i)    結(jié)果評定 。